高内涵分析系统预约注意
发布时间：2018年12月05日
作者：维护管理员
阅读次数：4622
预约提示：
高内涵分析系统主要用于多孔细胞板板载贴壁细胞样品拍摄，若要使用载玻片和细胞爬片，需要经过测试。
样品载体：
高内涵系统只支持128x85mm标准规格的透明底多孔板或1x3英寸载玻片。系统内建支持的多孔板可查阅文件。若首次使用多孔板，测试时请带一块空白板并测量A-I各项参数（参数精度要求达到0.01mm），或提供该板datasheet中的规格参数。其中板底厚度I可以上机实测。
特别提示：要获得最佳图像分辨率，需使用63x水镜，则孔底厚度 I不能超过0.18mm
|
正面 |
侧面 |
 |
 |
拍摄机制：
高内涵系统没有目镜，系统采用多视野拼接的方式直接获取图像，对于给定的物镜，根据该物镜所能支持的视野宽度，系统将整个样品载体的全面积划分为一个个的方格视野，如图：
| 4位载玻片支架 | 12孔细胞板 | 96孔细胞板 | 384孔细胞板 |
 |
|
 |
 |
简要拍摄流程:
- 检查并清洁孔板或玻片的上下光学面，消除一切碎片脱落、破损、液体冷凝滴漏的可能。
- 弹出托盘，稳妥放置样品板或4位载玻片支架，加载托盘。
- 使用低倍（20x）物镜，选择一个孔位，并选择一个视野，在高度=0位置进行明场试拍
- 若未找到视野或提示聚焦失败，重新选择视野（建议预先使用桌面上的定位网格标尺大致确定样品位置）。另一可能原因是拍摄参数过高，适当降低照明功率和曝光时间再试。
- 若已找到视野，可通过自定义z轴范围测试出最佳焦平面，然后将该层面z坐标设定为实际拍摄的hight，重置z轴范围为缺省值（禁用z轴扫描）
-
在Harmony软件中设定样品分布孔位并设定扫描孔位，在孔位分布图中选定要拍摄的视野范围。
- 按孔位定义样品分布、浓度、重复等layout信息
- 开始执行拍摄进程，系统面板上和硬件主机前面板的指示灯会指示进度。
- 扫描过程中即可建立分析算法。分析算法用于对各荧光通道中的细胞形态、信号强度等进行自动检测和定量、形成图表。
- 运行算法，导出分析数据。
- 运行评估，生成分析图表
高内涵分析算法测试：
高内涵分析的重点在于设计和测试适合自己实验的算法，具体资料请查阅Step2：简要流程 和 自学Step3：算法详解。拍摄结束后，可稍后另行预约使用我们的“高内涵数据分析计算机”，在方便的时间以较低代价对自己的数据进行分析和算法磨炼。
高内涵实验即用解决方案：
以下为部分使用内建算法可以直接实现的分析项目。在图像分析时，此类项目可直接调用例程，然后自己修改分析参数实现自动分析。
