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国产共聚焦显微镜免费试用
发布时间:2022年03月01日   作者:Confocal-Admin    阅读次数:1180

宁波永新光学提供国产NCF950激光共聚焦显微镜一台供所有用户免费试用,试用期3个月

该机将于3月2日完成配置后开放预约,供所有用户免费使用。

该机的数据为tiff格式,每次拍摄建立一个包含所有通道图像和配置文件的文件夹,数据可用Fiji等第三方软件打开和分析。

该机为纯国产设备,功能并不完善,但应付简单拍摄绰绰有余。我们会做好培训,欢迎有急迫采图需求的同学前来使用并提出宝贵意见和建议。

经初步测试,该机的主要问题在于预扫描速度较慢,拖动时图像有滞后感,部分操作需要手动切换。其它光学性能与现有设备差距不大。

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主要硬件参数:

可拍摄通道:DAPIFITCTRITCCY5

激光器:405nm488nm561nm640nm

检测器:400-750nm3PMT+近红外/明场PMT

复消色差物镜:10x20x40x60x

分辨率:512-4096

扫描速度:2/秒(512x512像素)

色深:16bit

可拍摄模式:4路荧光(含DIC明场)、z-stacktimelapse

输出文件格式:TIFF

使用方式:预约制,免费(1元/h)

请注意:

1、  该机为滤片型,不支持波长范围自由设定,只有处于4个滤片检测区间内的荧光标记才可以有效检测

2、  使用前须接受操作培训

3、  该机带CCD,可以作为宽场荧光显微镜使用,可拍摄通道与共聚焦模式相同

4、  推荐用途:简单拍摄和定性


附操作说明:

开机步骤:

1-6顺序开启机器:

1、  主控制器(显微镜右侧桌面黑色机箱)

2、  电脑(桌下),开机后单击桌面Nomis-Advance.App

3、  激光器电源(左侧白色机柜圆形按钮按下)

4、  激光器开关ON

5、  激光器启动钥匙(向右扭转)

6、  汞灯(荧光观察用,可不开启)

显微镜控制

1、  打开明场:
聚光镜顶部手柄向右拉到底(手柄露出6cm),打开LED照明光闸

显微镜左侧调焦螺旋前上方水平拨盘拨到同心圆图标,使图像转向目镜
按动显微镜左侧调焦螺旋前FLU按钮切换滤色转盘,直至明场出现

照明亮度可通过转动显微镜正面基部拨盘调整

2、  移动载物台:
手柄控制

3、  调焦:
粗调/细调螺旋

4、  荧光观察和滤色片切换:
在汞灯打开的情况下,按动显微镜左侧调焦螺旋前FLU按钮切换到相应的蓝、绿、红滤色转盘

5、  物镜切换:
手动,右手拨动物镜转盘

共聚焦成像

1、通道设置
系统只能拍摄蓝、绿、红、近红外共4个通道,其中近红外通道兼做DIC明场通道用

蓝通道用于拍摄DAPIHoechst之类的细胞核标记

绿通道用于拍摄GFPFITC之类的绿色荧光标记

红通道用于拍摄AF555、AF594RFPmCherry之类的红色荧光标记

近红外通道用于拍摄AF633Cy5、叶绿素之类的近红外荧光标记,可切换用于DIC明场成像

本机不能区分荧光颜色相近或有串色的多种荧光标记,但可以尝试改用分时拍摄方式尽可能区分。

2、参数设定

HV:检测器灵敏度,值越高信号越强,应尽可能低

OFFSET:消背景用的偏移值,一般取0

波长值:点击启用相应激光器,滚动条为功率百分比

LUT:图像色彩饱和度调整,一般不建议调,或建议后期图像处理时再调整
3
、启动拍摄前切换显微镜光路
显微镜左侧调焦螺旋前上方水平拨盘拨到箭头向左100图标,使图像转向扫描器
若需要拍明场,聚光镜顶部手柄向左推到底(手柄露出3cm),光路切换到明场/近红外检测器

4Live预扫描

建议点曝光时间设为2us,图像大小512

5Capture扫描
建议图像大小1024及以上

6、放大倍率
先通过控制手柄将目标移动至图像中心,然后点击相应的放大倍率

7、小孔

即针孔,值越小理论分辨率越高但信号强度减弱,值越大信号强度或灵敏度越高但图像会发虚。

文件管理

常规拍摄数据默认保存位置:D:\Nomis_Advance_ConfocalApp_0221\snap每次拍摄得到的图像自动保存于以日期时间命名的最新子目录中,目录中含有各通道图像、拼合图像、配置文件和16位原始数据目录

z-stacktimelapse数据自行定义请保存路径。

关机步骤

1、  关闭汞灯

2、  拷贝数据至U盘,关闭主控软件,关闭计算机

3、  激光器启动钥匙(向左扭转)

4、  激光器开关OFF

5、  激光器电源(左侧白色机柜圆形按钮按一下灭)

6、  主控制器(显微镜右侧桌面黑色机箱OFF